乙酰化修饰是体内高度保守的可逆转的蛋白修饰,对细胞核内转录调控因子的激活有着非常重要的作用。此外,还存在大量的非组蛋白乙酰化修饰参与了代谢通路及代谢酶活性的调节。
由于乙酰化修饰的蛋白质在生物样本中含量低、动态范围广,质谱分析前需要对乙酰化肽段进行富集以提高其丰度,然后利用传统的定量蛋白组分析手段对富集得到的乙酰化肽段样品进行定量分析。百泰派克公司采用肽段预分离降低高丰度组蛋白对蛋白乙酰化鉴定的影响,再结合免疫共沉淀通过**的抗体富集乙酰化的肽段,从而实现大规模乙酰化的鉴定及定量;所选用试剂盒为**上通用的由CST公司提供的乙酰化肽段特异性富集试剂盒;为了鉴定和定量更多的乙酰化肽段,我们在酶切过程中会使用2-3中不同的酶对蛋白样品进行酶切,保证带有乙酰化位点的肽段以**率离子化的方式进入质谱进行分析,排除因为肽段长度不合适、离子化效率低造成的乙酰化信息的丢失。
百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台,Orbitrap Fusion质谱平台,Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,推出乙酰化定量蛋白组分析服务技术包裹,您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的样品寄给我们,我们会负责项目后续所有事宜,包括蛋白提取、蛋白酶切、乙酰化肽段富集、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。
乙酰化定量蛋白组学分析流程
关于样品
1. 如果您提供的是组织样品,请您干冰将组织样品寄给我们。
2. 如果您提供的是蛋白样品,蛋白提取时使用普通的组织、细胞裂解液即可。
3. 样品运输:请使用足量的干冰运输,并且尽量选用较快的邮递方式,以降低运输过程中样品降解的可能性。
4. 在正式实验之前,我们都会对您提供的样品进行检测,检测合格后开始正式试验。
研究案例
该项目是中国科学院生物物理所一位老师Co-IP样品在百泰派克进行蛋白泛素化修饰位点鉴定。得到的部分结果如下图所示:
中/英文项目报告
在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:1. 实验步骤(中英文)2. 相关的质谱参数(中英文)3. 鉴定的乙酰化位点的详细信息4. 质谱图片5. 原始数据
乙酰化定量蛋白组学一站式服务
您只需下单-寄送样品百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告