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同位素相对标记与**定量技术（iTRAQ技术）

简介：

       iTRAQ技术（同位素相对标记与**定量技术）是 近年来**开发的一种新的蛋白质组学定量研究技术。iTRAQ试剂盒包括八种同量的胺活性试剂，能对蛋白质水解的肽段进行标记，因此采用串联质谱方法，可以对肽段进行**的鉴别和定量。能够得到：一般 500 至 600 种蛋白，以及不同样品间蛋白质表达的差异。 

应用：

• 同时标记 8 个样品，一次实验实现多达 8 个样品的蛋白质鉴定和定量

• 非常高的通量

• 可以进行多个时间点蛋白质组动态变化的监测，

• 可以分析详细分期／型的临床疾病样本，并可设计样本重复

• 甚至可以进行个体样本的研究

• 细胞周期、细胞信号传导整个过程的蛋白质组动态学

技术特点和优势

• 定量敏感、反应速度快

• 标记完全，标记效率高达 97%以上

• 较高的重复性，能简化谱的复杂程度、提高离子强度

• 可对多达八种不同样本同时进行定量分析

• 定性与定量同时进行

实验大致流程：

       操作时首先是对不同蛋白质样品分别进行酶解，并采用不同的标记对酶解片段进行标记后混合，结合多维色谱分离和后续的串联质谱鉴定，从而实现对不同 来源样品蛋白进行分离和鉴定的目的，我们可以提供 8 重标记 iTRAQ 标记，可 以对多达 8 种不同样本同时进行定量分析。

原理：

      iTRAQ 试剂包含八种不同的胺活性试剂。每种胺活性试剂与水解后肽段结 合。胺活性试剂包含报告基团和平衡基团。

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