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    制造商,服务商

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          营业执照已认证

  • 注册年份:

    2008

  • 主     营:

    蛋白组学技术服务,蛋白互作,双向电泳,质谱鉴定,SILAC,DIGE,iTRAQ,病毒服务,细胞生物学,分子生物学,2D WB,COIP,生物信息学,tap/ms,ap/ms,病毒包装

  • 地     址:

    广州高新技术产业开发区科学城掬泉路3号广州国际企业孵化器D504-505

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DNA pull down技术服务
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产品: 浏览次数:443DNA pull down技术服务 
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最后更新: 2024-03-13 11:56
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技术概述DNA pull down-MS是体外研究DNA与蛋白互作的有力工具。该技术将生物素标记的DNA片段结合在链霉亲和素磁珠上,再与细胞核蛋白孵育,纯化出与DNA片段互作的蛋白,洗涤洗脱得到的蛋白产物,做western-blot检测特定蛋白是否与靶DNA片段结合;做质谱鉴定即可筛选出与DNA片段可能互作的蛋白信息(如具体某个或某些转录因子/组蛋白等)。

 技术原理

生物素与链霉亲和素间的作用是目前已知强度**的非共价作用;其中活化生物素可以在蛋白质交联剂的介导下,与已知的几乎所有生物大分子偶联。因此用生物素标记核酸后,利用生物素和链霉亲和素之间的亲和作用,可以纯化出各种生物大分子复合物。       DNA pull down实验首先针对靶标区域设计DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,洗脱得到DNA片段的结合蛋白质。 技术应用

目的DNA片段的互作蛋白(如转录因子等)筛选。 技术流程      

辉骏生物:DNA pull down技术流程 服务信息

DNA pull down服务内容


参考文献1.A requirement for breast-cancer-associated gene 1 (BRCA1) in the spindle checkpoint. Proc Natl AcadSci U S A 101(49):17108-17113(2004).
       
2.Identification of DNA-binding proteins that interact with the 5'-flanking region of the human D-amino acid oxidase gene by pull-down assay coupled with two-dimensional gel electrophoresis and mass spectrometry. J Pharm Biomed Anal 116:94-100(2015).


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