技术概述 RIP是研究体内蛋白与RNA互作的重要技术。该技术先用甲醛等试剂交联细胞内的“蛋白-RNA”互作复合物,裂解细胞后,用靶蛋白特异的抗体(或标签抗体)做免疫沉淀,获得“靶蛋白-RNA”互作复合物,去交联分离其中的RNA;针对预测的靶蛋白结合RNA的序列设计引物,做qPCR实验,验证预测的RNA是否与靶蛋白有结合;或者将分离出来的RNA做高通量测序,筛选到可能与靶蛋白结合的RNA。
技术应用
目的蛋白的互作RNA筛选。
技术流程
服务内容
参考文献1.RIP: RNA Immunoprecipitation. Methods MolBiol 1480:73-86 (2016).
2.Mitochondrial iron chelation ameliorates cigarette smoke-induced bronchitis and emphysema in mice. Nat Med 22(2):163-174(2016). 3.Identification and dynamic changes of RNAs isolated from RALY-containing ribonucleoprotein complexes. Nucleic Acids Res(2017).