GB-T 18979-2003 食品中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法标准规定了免疫亲和层析净化—高效液相色谱法和免疫亲和层析净化—荧光光度法测定食品中黄曲霉毒素的条件和详细分析步骤
本标准适用于玉米、花生及其制品(花生酱、花生仁、花生米)、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。
样品中黄曲霉毒素的检出限:免疫亲和层析净化—高效液相色谱法和免疫亲和层析净化—荧光光度法为1mg/kg;免疫亲和层析净化—荧光光度法测定酱油样品中黄曲霉毒素检出限为2.5mg/kg。
免疫亲和层析净化高效液相色谱法
方法提要
试样经过甲醇-水提取,提取液经过滤、稀释后,滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化,此抗体对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2具有专一性,黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上。用水或吐温/PBS将免疫亲和柱上杂质除去,以甲醇通过免疫亲和层析柱洗脱,洗脱液通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘溶液衍生测定黄曲霉毒素的含量。
仪器和设备
实验室常规仪器、设备、材料及下列各项。
1 高速均质器:18,000 r/min ~22,000 r/min。
2 黄曲霉毒素免疫亲和柱。
3 玻璃纤维滤纸:直径11cm,孔径1.5μm。
4 玻璃注射器:10 mL,20mL。
5 玻璃试管:直径12 mm ,长75mm,无荧光特性。
6 高效液相色谱仪:具有360nm激发波长和大于420nm发射波长的荧光检测器。
7 空气压力泵。
8 微量注射器:100mL。
9 色谱柱:C18柱(柱长150 mm ,内径4.6mm,填料直径5mm)。
10柱后衍生